看点 dna7075
详解核酸等温扩增技术
近年新发展起来的核酸等温扩增技术,⽆论是在实际操作还是仪器要求⽅⾯,都⽐
PCR
技术更
为简单⽅便,它摆脱了对精良设备的依赖,在临床和现场快速诊断中显⽰了其良好的应⽤前
景。在众多等温扩增技术中,环介导等温扩增⽬前已在⼀定范围内得到了应⽤,其他⼀些新发
展起来的等温扩增技术,如链替代等温扩增、滚环等温扩增、依赖解旋酶等温扩增、依赖核酸
序列等温扩增、单引物等温扩增和核酸快速等温检测放⼤等技术,也在不断发展与完善之中。
为了更好地有选择地开发利⽤这⽅⾯技术,现就这些等温扩增技术的原理、特点及应⽤进⾏简
要另外。
环介导等温扩增
(Loop-mediated isothermalamplification
,
LAMP )
环介导等温扩增
(LAMP)
是
Notomi
等于
2000
年⾸先提出来的⼀种新的核酸扩增技术,其原理主要
是基于靶基因
3'
和
5'
端的
6
个域设计
3
对特异性引物,包括
对外引物、
对环状引物和
对内引
物,
3
种特异引物依靠链置换
BstDNA
聚合酶,使得链置换
DNA
合成不停地⾃我循环,从⽽实现
快速扩增。反应
1h
后可根据扩增副产物焦磷酸镁沉淀形成的浊度或者荧光染料进⾏判断扩增情
况。此反应先形成哑铃状模板,进⼊循环扩增阶段,再进⾏伸长、循环扩增,共
3
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